新闻中心更多>>
- 北京东迅:细胞计数板的计数事项及注意点
- 点击次数:2981 更新时间:2022-04-20
- 细胞计数一般用血细胞计数板,按白细胞计数方法进行计数,便于确定细胞的生活状况。在细胞培养工作中,常需要了解细胞生活状态和鉴别细胞死活,确定细胞接种浓度和数量以及了解细胞存活率和增殖度,如用酶消化制备的细胞悬液中细胞活力的鉴别,冻存细胞复苏后的活力检测等。
细胞悬液制备后,常用活体染料台盼蓝对细胞进行染色,进行细胞计数。台盼蓝不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色。而死亡细胞的细胞膜通透性增高,可使染料进入细胞内而使细胞着色(蓝色)。细胞悬液细胞数/ml=4个大格细胞总数/4×10,000。如计数前已稀释,可再乘稀释倍数。计数时,只计数完整的细胞,若聚成一团的细胞则按一个细胞进行计数。在一个大方格中,如果有细胞位于线上,一般计下线细胞不计上线细胞,计左线细胞不计右线细胞。二次重复计数误差不应超过±5%。镜下观察,凡折光性强而不着色者为活细胞,染上蓝色者为死细胞。注意事项:1.务必使分散成单个细胞,取样计数前,充分混匀细胞悬液。2.显微镜下计数时,遇到2个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算。如果细胞团>10%,说明细胞分散不充分。3.置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数。对于压线的细胞只计数在上线和左线者,对于细胞团按单个细胞计数。